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- 阿尔玛蓝细胞增殖及毒性检测试剂
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产品描述 描述 阿尔玛蓝(Alamar Blue)是一种细胞活力检测试剂,包含一种具细胞膜渗透性、无毒性且弱蓝色荧光的指示剂,即刃天青(resazurin)。自从1993年开始刃天青就作为一种值得信赖和可靠的试剂被引用。阿尔玛蓝是MTT(噻唑兰)的有效且无毒替代物。阿尔玛蓝能定量检测人、哺乳动物、细菌、真菌和支原体细胞的增殖情况,也能用于细胞因子生物活性、细胞活力分析、体外细胞毒性确定以及细胞生长监测。
阿尔玛蓝的工作原理在于:刃天青是一种氧化还原(REDOX)指示剂,根据细胞代谢还原情况发生颜色变化。氧化态的刃天青呈紫蓝色且基本无荧光,其还原态产物试卤灵(resorufin)转变为粉红色且高度荧光,产生的荧光强度与呼吸活细胞数量呈正比。通过检测呼吸过程中氧化水平,阿尔玛蓝用作一种定量检测细胞活力和毒性的直接指示剂。阿尔玛蓝的颜色变化可通过普通分光光度计检测吸光度变化,检测波长为570nm,参考波长为600nm;阿尔玛蓝的荧光变化可通过荧光光度计检测,激发波长在530~560nm之间,发射波长为590nm;
与台盼蓝、TTC、MTT、MTS等分析法相比,阿尔玛蓝为单一试剂,可连续快速的检测细胞的增殖情况。阿尔玛蓝对细胞无毒无害,不会干扰电子传递链,不会干扰细胞呼吸或功能,也不会影响细胞的抗体合成与分泌等活性,因此适用于对同一批细胞的增殖情况进行连续观察和更进一步的观察,具有操作简便和几乎不干扰正常代谢的特征。外观 溶液技术指标 5mL(500T)
10mL(1000T)
50mL(5000T)产品用途 细胞增殖和毒性检测使用方法 详见产品说明书注意事项 1、还原态的Alamar Blue在水或水溶性缓冲液如PBS中很不稳定,但在培养基内非常稳定。为了确定特定实验还原态Alamar Blue的吸光度/荧光值,需准备100%还原态Alamar Blue试剂:将Alamar Blue与细胞培养基按照1:10的比例混合,高压灭菌15min即可。
2、适宜的细胞密度能够增加检测灵敏度。对于96孔板,建议每孔接种100μl细胞,细胞浓度范围:贴壁细胞为100-10,000个/孔,悬浮细胞在2,000-50,000个/孔,以培养基为空白对照。对于384孔板,细胞浓度和接种量均减半。
3、影响细胞对Alamar Blue反应的两大变量为孵育时间和铺板密度,建议实验前需先摸索优化这两个因素。细胞密度过高或孵育时间过长都会导致继发性还原反应,红色产物停止增加并开始衰减,导致吸光度/荧光水平明显下跌并伴随红色消失。
4、微生物污染会还原Alamar Blue。因此对被污染细胞使用Alamar Blue检测会引起错误结果。
5、Alamar Blue可以用分光光度计或荧光计检测,但荧光灵敏度高,实验误差小,推荐荧光检测。
6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。基本信息 储存/保存方法 4℃避光保存,有效期12个月。温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究