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- 细胞增殖检测试剂盒(MTS)
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产品描述 描述 MTS细胞增殖检测试剂盒 (MTS Cell Proliferation Assay Kit)是一种常见的细胞增殖与毒性检测试剂盒。MTS是一种新型四唑盐,可以被活细胞线粒体内的琥珀酸脱氢酶还原成溶于水的产物甲臜(Formazan)。甲臜在490 nm处有特异性吸收,所以可以通过测定490 nm处的吸光度反映细胞增殖情况。细胞增殖越快,吸光度值越高。
与常见的MTT试剂盒相比,本试剂盒无需去除原有培养基,也无需另外使用溶剂溶解甲臜,使用更方便,同时可以避免去除培养基时带走部分甲臜而引起的实验误差。本试剂盒使用非常灵活,检测后可继续孵育,以得到更好的显色结果。此外,本试剂盒还具有线性范围宽、灵敏度高、使用安全等优点。
产品组分:名称 500T 2500T MTS Solution 10mL 50mL PMS Solution 0.5mL 2.5mL 使用方法 实验操作:
1、MTS工作液配制:
将MTS Solution和PMS Solution按20:1的比例混匀即为MTS工作液。配制好的MTS工作液如需储存应置于-20℃避光保存,此时建议适量分装以避免反复冻融。
注意: MTS Solution 和 PMS Solution 见光都易分解,因此配制和使用过程中都需要避光 (可以用锡纸包住)。如需频繁使用,想将本试剂盒置于4°C 保存,此时应每次在检测前配制 MTS 工作液。配制好的未使用 MTS 工作液则需要置于-20°C避光保存。
2、细胞培养:
将细胞接种于孔板等合适容器中。对于96孔板,建议每孔加入100uL培养基,同时建议每孔接种5-100×103个细胞。可以根据实验设计用感兴趣的药物处理实验组细胞一段时间,此时需要另外设立空白组(仅含培养基) 和对照组 (含培养基、细胞和药物溶剂)。
注意:具体每孔接种的细胞数量可以根据具体细胞种类进行调整。
3、MTS孵育:
每孔加入20 uL的MTS工作液,随后放入细胞培养箱孵育1-4 h。
注意:MTS 孵育时间可以根据具体实验进行调整。
4、检测:
用酶标仪于490 nm处测定吸光度(A)。若无490 nm滤光片,可选择使用450-540 nm滤光片。
5、数据分析:
细胞存活率计算公式如下
细胞存活率 (%)= [(A实验组-A空白组) / (A对照组-A空白组)] ×100注意事项 1、细胞长时间培养时,96孔板的边缘孔容易出现液体蒸发问题。建议舍弃96孔板的周围一圈,改加无菌水,培养基或者PBS;同时可以将96孔板置于培养箱中靠近水源的地方。
2、MTS Solution和PMS Solutin在低温下会凝固,使用前请提前回温至室温或37℃水浴约10 min直至融解后使用。
3、MTS Solution和PMS Solution对光照敏感,如果置于4°C保存时,溶液颜色可能会发生轻微变化,这种变化可能会使本底吸光度值上升,但是不会影响最终的实验结果。
4、如不能及时检测,可以在步骤3孵育结束后每孔加入25uL的10%SDS终止反应。经SDS处理后的孔板可以放置
于培养箱中避光保存不超过18 h。
5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。基本信息 储存/保存方法 Store the kit at -20°C away from light and moisture, stable for 1 year. For frequent use, the kit can be stored at 4°C away from light and moisture, stable for 6 weeks.温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究