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- 外泌体提取试剂盒

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外泌体提取试剂盒
概述 描述 本试剂盒采用磁珠捕获法提取外泌体,试剂盒中的功能性修饰的磁珠可以特性的捕获总的外泌体 (EVs); 它能从尿液、唾液等体液样本或细胞上清中提取完整的外泌体,无需超速离心,可同时操作多个样本,方便高效。
产品特点:
兼容性广:可满足多种不同类型的样本,如尿液、细胞上清、唾液、脑脊液等。
操作简便: 无需超离,仅需2 h。
性价比高: 多种样本,一盒搞定。
产品原理:
产品组分:名称 规格 储存 EVtrap magnetic 1mL 2-8℃ Incubation buffer I 5mL 常温 Incubation buffer II 50mL 常温 Washing Buffer 50mL 2-8℃ Elution Buffer 20mL 常温 使用方法 注:该试剂盒适用于多种样本,如尿液、细胞上清、唾液及脑脊液等,具体使用比例见下表:以尿液样本为例,操作流程如下:样本类型 样本体积 EVtrap magnetic使用量 尿液 1mL 20 μL 细胞上清 1mL 5 μL 唾液 1mL 50 μL 脑脊液 1mL 50 μL
取晨尿(中段尿),2500g 离心10min 以去除细胞碎片,收集上清,重复1次,将处理好的尿液放置在-80 ℃储存备用。
外泌体的分离纯化
1、向 1 0 mL 的尿液中加入1mLIncubation Solution I上下混匀(若尿液储存在-80 ℃,可以在37℃的水浴中解冻后使用)。
2、加入200 μL 的 EVtrap magnetic 室温下孵育0.5-1 h, 磁吸去上清。
3、加入10 mLIncubation Solution Ⅱ 上下颠倒混匀20-30次,磁吸去上清。
4、加 入 5 mLWashing Buffer上下颠倒混匀20-30次,磁吸去上清,洗1次。
5、加 入 1mLWashing Buffer上下颠倒混匀20-30次,转移至1.5 mL 离心管,磁吸去上清。
6、加入200 μL 的 Elution Buffer, 涡旋10 min。
7、磁吸收集洗脱液,重复步骤6,将两次洗脱液共400 μL 合并到一个离心管中,涡旋混匀后再瞬离。
8、冻干洗脱液,将冻干后样品置于-80 ℃长期保存,或用于下游检测实验。性能 储存/保存方法 2-8℃,有效期12个月。注意事项 1、将 EVtrap magnetic 储存在4℃,孵育液和洗涤液等储存在室温。
2、磁吸时请使用高磁磁力架(#abs7980或#abs7982或#abs7983),以保证磁珠的外泌体捕获效果。
3、在任何洗涤步骤中不要剧烈涡旋。将样品上下颠倒20-30次使磁吸后的磁珠结团分散即可。
4、孵育后的操作步骤中,在进行上下颠倒混匀时,动作要轻柔,以避免与 EVtrap magnetic 捕获的外泌体脱落。实验结果图使用EVtrap提取的外泌体WB检测结果Transmission electron microscopy (TEM) images of (A) single EV and (B) multiple EVs captured from the plasma by EVtrap. TEM imaging of EVs was carried out on a Hitachi H-8100 electron microscope with an accelerating applied potential of 200 kV. (C) Nanoparticle analysis using NTA after elution off EVtrap beads. (D) Nanoparticle analysis using TRPS after the elution of EVtrap beads.外泌体提取试剂盒温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究


