一、仪器参数调节
1. 收集1×106-3×106个细胞，用预冷PBS离心洗涤两次，弃上清。
2. 加入500uL Apoptosis Positive Control Solution重悬，置冰上孵育30分钟。
3. 用预冷PBS离心洗涤，弃上清。
4. 加入适量预冷1×Binding Buffer重悬，并加入数量相同且未经处理的活细胞与之混合。加入预冷1×Binding Buffer补充至1.5mL，等分成三管，其中一管为空白对照管、两管为单染管。
5. 单染管分别加入5uL Annexin V-APC或10uL 7-AAD室温避光孵育5分钟。
6. 在流式细胞仪上，用空白管调节FSC、SSC和荧光通道的电压，并在此电压条件下，用单染管调节荧光
通道的补偿。
注：某些将贴壁细胞处理为单个细胞的过程中会造成细胞膜损伤，从而造成Annexin V假阳性。因此需要进行优化。推荐使用对细胞更温和的酶如Accutase处理贴壁细胞。

二、样本检测
1. 按实验方案诱导凋亡。
2. 用预冷PBS离心洗涤，收集1-10×105个细胞（包括培养上清中的细胞）。用双蒸水稀释5×Binding Buffer为1×工作液，取500uL 1×Binding Buffer重悬细胞。
3.  每管加入 5uL Annexin V-APC 和 10uL 7-AAD。
4.  轻柔涡旋混匀后，室温避光孵育5分钟。
5. 上机进行分析。

1. 请在使用本产品前仔细阅读说明书。 本产品仅用于科研，不可用于诊断。
2. 为了您的安全和健康，请穿戴实验防护fu、手套、口罩等必要的防护装备。

Annexin V-APC/7-AAD Apoptosis Analysis Kit

2-8°C保存，切勿冻存，有效期1年。