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- 细胞消化液
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描述
Accutase 是包含蛋白水解酶和胶原酶活性的一种细胞消化液,不含任何动物和细菌来源组分。作为YI酶-EDTA 消化液的替换产品,用于从常规组织培养器皿、粘附包被培养器皿和聚合物上消化细胞。Accutase 比哺乳动物源的YI酶和胶原酶更加有效,因其所含活性成分浓度更低,对细胞伤害更小且更温和,但能维持相同效力。Accutase在以下应用的细胞消化表现极其优秀,包括:连续性细胞培养、细胞表面标记的分析、病毒生长实验、细胞饥饿诱导的静止分析、癌基因转染的细胞转化实验、神经嵴细胞迁移实验、细胞增殖、细胞趋触和肿瘤细胞迁移实验。
本品为即用型的无菌溶液,溶于DPBS(含0.5mM EDTA 和3mg/L 酚红),经证实有效消化成纤维细胞、内皮细胞、神经元、肿瘤细胞系、胚胎干细胞、间充质干细胞和神经干细胞。
使用方法
(1)于4℃或冰水浴融化Accutase【勿于37℃融化】;
(2)吸掉培养基,用不含钙镁的1X DPBS 清洗细胞一次;
(3)加入适量的Accutase 消化液覆盖细胞【典型情况按照细胞汇合度,加入2.5-5ml 到T25 培养瓶足以】;
(4)37℃或室温条件允许细胞消化5-10min,或直至细胞*消化。【消化过程中经常观察,判断细胞粘附在固相表面的同时是否变圆,并不仅仅是发生收缩或不再呈突触状。使用Accutase 消化细胞高达1h,不会造成细胞伤害】
(5) 一旦细胞变成球状,轻拍培养瓶或皿以让粘附细胞*脱落。
(6)细胞计数,之后用新鲜培养液重悬继续培养,或者收集细胞用作其他用途。【不需另做清洗和酶活终止步骤】