Western一抗二抗去除液又称膜再生液或Western抗体洗脱液(Stripping buffer),用于Western中转移了蛋白的膜的重复利用。在Western中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后,有时还需要检测GAPDH、β-actin等表达量相对稳定的管家蛋白或其它蛋白作为参照。Stripping buffer可以洗脱一抗二抗,非常方便地重新利用使用过的膜,检测其它蛋白。 Stripping buffer多次重复使用同一张膜,会导致蛋白信号的减弱不宜重复利用膜,一般可以利用3-5次。
通过使用一抗二抗去除液,充分去除一抗二抗,可以非常方便地重新利用使用过的膜检测其它蛋白。和重新跑一个 SDS-PAGE 胶相比,不仅省时省力,而且可以消除重新上样而带来的误差,使可比性更强。
Western 一抗二抗去除液(中性)主要在去除结合的一抗二抗的原理方面略有不同。分别依靠去垢剂、弱碱性、碱性、还原剂、螯合剂、盐浓度以及一些特殊试剂等的不同组合来解除一抗二抗的结合,同时又不会导致转移到膜上的蛋白的损失。