- 即用型高效免疫组化二抗试剂盒
- 即用型高效免疫组化二抗试剂盒
包装:5ml(可用于50张片子)
适用:一抗来源于小鼠或兔子
显色底物:DAB (联苯二胺)
试剂组成:
组分编号 组分名称 规格 数量 A 过氧化氢 5ml 1 B 超级封闭液 5ml 1 C 一抗放大剂 5ml 1 D 酶标二抗聚合物 5ml 1 E DAB A液 5ml 1 F DAB B液 160ul 1 未提供但必需试剂:一抗(来源于小鼠或兔子)、PBS (磷酸盐缓冲液)
本试剂盒是基于聚合物技术的一代免疫组化二抗非生wu素检测系统,信号更强、操作更加简单。 与传统的免疫组化二抗试剂盒相比,具有3个特点:一是由于聚合物的独到之处,使得酶分子与二抗IgG分子直接结合形成的多聚物分子高度敏感性,有效减少了一抗使用量,一抗试剂可再稀释2-4倍;二是由于避免了生wu素的使用,从而可以避免由于生wu素引起的非特异性背景显色,得到更清晰的显色和更干净的背景;三是快速,更短的试剂孵育时间。
储存及有效期
2-8°C保存。每个组分至少可以保存18个月。
操作步骤:
说明:所有的步骤在室温下操作,加试剂可以直接滴瓶滴定,也可以用移液器,一滴=30-40ul
1. 脱蜡、水化组织切片
2. PBS洗2-3次各5分钟
3. 根据所应用的一抗的特殊要求,对组织切片进行预处理
4. PBS洗2-3次各5分钟
5. 加入100ul A 液孵育十分钟,阻断内源性过氧化物酶,以减少非特异性背景染色
6. PBS洗2-3次各5分钟
7. 加入100ul B 液孵育五分钟来减少非特异性染色。注意:此步骤不要超过十分钟;如果一抗在含有5%至10%正常山羊血清的缓冲液中稀释,则此步骤可以省略
8. PBS洗2-3次各5分钟
9. 加一抗,室温或37℃孵育20分钟
10. PBS洗2-3次各5分钟
11. 加入100ul C 液孵育十分钟
12. PBS洗2-3次各5分钟
13. 加入100ul D 液孵育十分钟.注意:此液对光敏感,注意避光
14. PBS洗2-3次各5分钟
15. 配制新鲜底物液:将30ul的 F 液和1ml的 E 液充分混合,即配制成新鲜底物液(该底物液可存放2周)
16. 加入100ul新鲜底物液, 孵育五分钟
17. 去离子水冲洗
18. 复染,封片