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- WB辅助试剂盒(兔)
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概述 产品组分 试剂组分 包装规格 10*电泳液 100ml*1 10*电转液 100ml*1 10*TBST 100ml*1 2*上样缓冲液 1ml*1 PVDF膜(0.45um) 2张 显色A液 6ml*1 显色B液 6ml*1 BSA 5g*1 脱脂奶粉 5g*1 预染marker(#abs923) 20ul*1 二抗(anti-rabbit-HRP)(#abs20002) 50ul*1 性能 保存方法 2-8度保存,有效期6个月。 操作步骤 1) 取准备好的蛋白裂解液,和2*上样缓冲液等体积混合,混匀后于100度煮10min,12000rpm离心5min,取适量体积上样。
2) 电泳:使用配制好的电泳液,90V电泳20min,120V电泳至结束。
3) 转膜:使用配制好的电转液,100V恒压电转90min。
4) 封闭:用1*TBST配制5%的脱脂奶粉/BSA溶液,将膜置于5%的脱脂奶粉/BSA溶液中,室温摇床上孵育60min。
5) 孵育一抗,孵育条件为2-8度摇床上孵育过夜。
6) 洗涤,用1*TBST洗3次,每次10min。
7) 孵育二抗,孵育条件为室温摇床上孵育60min。
8) 洗涤,用1*TBST洗3次,每次10min。
9) 显色和曝光,取显色A液和B液等体积混合,将混合后的液体铺满整张膜,反应2min,之后即可进行曝光操作。用法说明 溶液配制
电泳液:取10*电泳液100ml,加入纯化水,定容至1000ml。
电转液:取10*电转液100ml,加入800ml纯化水和100ml无水甲醇。
1*TBST:取10*TBST溶液100ml,加入纯化水,定容至1000ml。