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- 脱氧核糖核酸酶 I
- 脱氧核糖核酸酶 I
产品描述 描述 DNase I (脱氧核糖核酸酶 I)是一种可消化单链或双链 DNA 的脱氧核糖核酸内切酶,它识别并切割磷酸二酯键,产生 5’端为磷酸基团,3’端为羟基的单脱氧核苷酸或单链或双链的寡脱氧核苷酸。DNase I 的活性依赖于 Ca2+ , 并可被二价金属离子如 Mn2+ , Zn2+等激活。5mM Ca2+可保护酶使其不被水解。而在Mg2+存在下,该酶可随机识别和切断 DNA任一链上的任意位点;而在 Mn 2+存在的条件下,可同时识别 DNA 的两条链并在几乎相同的位点进行切割,形成平末端或有 1-2 个核苷酸突出的粘末端 DNA 片段。
酶存储液:10mM Tris-HCl, 2mM CaCl2, 50% glycerol, pH 7.6 25℃。
活力定义:1 活力单位(U)指在 37℃条件下,10 分钟降解 1μg pBR322 DNA 所需要的酶量。
质量控制:
RNase 活性:5 U 的本品和 1.6 μg MS2 RNA 在 37℃下反应 4 小时,RNA 的电泳谱带不发生变化;
细菌内毒素(Endotoxin):LAL-Test,中国药典 2020 版 第四部凝胶限度试验法通则(1143),细菌内毒素含量≤10 EU/mg。
产品组成组分名称 200μL(1 KU) 1ml(5 KU) DNase I,RNase-free
200μL 1ml 10×DNase I Buffer
1ml 5*1ml 来源 DNase I 在酵母表达体系中表达并分离纯化得到。浓度 5U/μL使用方法 1、在RNase-free反应管中按照下表比例配置反应液:
组分 加入量 RNA X μg 10 × DNase I Buffer 1 μL DNase I, RNase-free(5U/μL) 1 U per μg RNA ddH2O Up to 10 μL
2、37℃孵育 15min。
3、 加入终止 Buffer 终止反应, 65℃加热 10 分钟使 DNase I 失活,样本 可直接进行下一步转录实验。储存/保存方法 -20 ℃以下保存。
避免反复冻融或频繁暴露于温度变化中,刚开始使用时建议进行分装。
产品效期:12个月注意事项 1、每μg RNA 使用 1U DNase I, 如果 RNA 少于 1μg, 请使用 1U DNase I。
2、为避免酶失活过程中 RNA 被降解,应添加终浓度为 5mM 的 EDTA。温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究