通用型组织解离液-单细胞样本制备标准protocol

一、实验前准备-全套试剂耗材

组织样本处理全套试剂耗材实拍图：

配套产品清单：

• PBS缓冲液 abs961、abs962

• 70μm筛网 abs7232

• RPMI1640培养基 abs9484

• 红细胞裂解液 abs9101

• 细胞分离液 abs9102

• 组织解离液 abs9482（核心产品）

二、样本取材及预处理

操作说明：小鼠断颈处死后，根据实验需求进行取材，可分离取材部位包含：结肠、脾脏、肠道组织、肺组织等各类小鼠脏器。

三、标准化组织解离步骤参考

1、组织消化解离

1. 酶消化：将组织块（约100-200mg）转移至离心管，加入 1 mL 组织解离液abs9482（难消化组织可延长孵育时间）。

2. 摇床孵育：将离心管置于 37℃恒温水平摇床，以 80-100 rpm 的转速孵育 30-40分钟。【也可使用全自动组织处理器替代手动摇床】

3. 过滤过筛：70μm 细胞筛网（abs7232）过滤，预冷 1×PBS 3-5mL 冲洗筛网；
   注：过滤筛网时若残留明显组织块，可用5 mL注射器活塞研磨组织，直至无肉眼可见组织碎片。

4. 细胞悬液 4℃，400 g 离心5 min，弃去上清；

5. 细胞沉淀使用预冷1x PBS（abs962）重悬，4℃，400 g 离心5 min，弃去上清；

6. 可选步骤：根据实验需求，使用红细胞裂解液（abs9101）去除样本内红细胞干扰；

7. 适量预冷1x PBS重悬细胞沉淀，得到纯净单细胞悬液，可直接用于后续流式、细胞分选等实验。

2、细胞计数，活率测定

使用本解离液解离小鼠不同组织制备单细胞悬液后，可通过流式细胞仪检测细胞活率，不同脏器样本均能获得高活率单细胞。

5、流式结果展示

小鼠脾脏组织单细胞悬液流式染色结果

小鼠肺脏组织单细胞悬液流式染色结果

小鼠肝脏组织单细胞悬液流式染色结果

小鼠小肠组织单细胞悬液流式染色结果

小鼠肾脏组织单细胞悬液流式染色结果

小鼠心脏组织单细胞悬液流式染色结果

四、通用型组织解离液-abs9482 已发表文献汇总

配套完整试剂耗材产品清单