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- 距离毕业答辩还有_天,组化实验做不完,小爱过来想办法
- 点击次数:2369 更新时间:2020-03-20
一眨眼已经到了三月中旬了,想必各位老师渡过了一个学生时代长的寒假,假是放舒服了,可这实验可怎么办呢,
怎么样才能快速结束自己的实验并有一个好的结果呢,小爱不忍大家在家里着急上火,献给大家小爱六字真言:
多 色 组 化 服 务 !
多重荧光免疫组化(mIHC)实验原理
TSA 技术 (Tyramide Signal Amplification™,酪胺信号放大技术):简单来说,用该方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的 HRP(而不是直接偶联荧光素),来催化后续添加入体系的非活性荧光素。
荧光素在 HRP 和过氧化氢的作用下被活化,跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联,使得蛋白样品与荧光素稳定结合。
然后微波处理,前一轮非共价结合的抗体被洗掉,共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育,周而复始。等到所有抗体孵育结束,荧光素都结合好后,后去检测结果。
由于每次体系中都只有单一抗体孵育,因此无需担心抗体交叉反应,以及一抗二抗种属匹配问题,大大减少了实验设计时不同种属抗体选择匹配的限制。
也就是说,如果用 TSA 技术,同一张片子上所有的靶标都可以选用特异性高的兔单克隆抗体。搭配同一支抗兔的 HRP 二抗就可以进行实验,而且信号放大的倍数大大增强。
荧光法多重免疫组化,可同时进行五个颜色通道以上,这种情况下发射光谱会重叠,我们可以借助多光谱成像系统来解决这个问题。这是传统间接荧光法染色和显色法多重免疫组化所做不到的。而且还能真实反映关键蛋白的表达情况和相互之间的关系,从而极大地节约珍贵的样品。
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实验步骤 推荐指数 货号 产品名称 规格 分类 样本制备 abs9134 Formaldehyde 25ml,500ml,1L,4L 固定液 ★★★★★ abs9179 4%多聚甲醛/通用型组织固定液 500ml 固定液 ★★★ abs9131 Chromium(III) potassium sulfate dodecahydrate 5g,100g 处理玻片防脱片 ★★★ abs9172 Poly-D-lysine (Mw 150,000-300,000) 25mg 处理玻片防脱片 ★★★ abs9135 Gelatin 100g,500g 处理玻片防脱片 辅助试剂 abs9256 10×TBS 500ml 缓冲液 abs952 10*TBST 100ml,1L 缓冲液 abs961 10×PBS缓冲液 500ml,500ml*10 缓冲液 abs962 1×PBS缓冲液 500ml,500ml*10 缓冲液 abs9149 Triton X-100/曲拉通X-100 100ml,500ml 缓冲液 抗原修复 abs9145 Pepsin(1:3000) 50g,100g 抗原修复液 abs9118 Proteinase K 100mg,1g 抗原修复液 ★★★ abs9247 EDTA抗原修复液(50×) 100ml 抗原修复液 ★★★ abs9207 冰冻切片快速抗原修复液(5×) 100ml 抗原修复液 ★★★ abs9249 柠檬酸钠-EDTA抗原修复液(40×) 100ml 抗原修复液 ★★★ abs9248 柠檬酸钠抗原修复液(50×) 100ml 抗原修复液 ★★★ abs9208 细胞爬片抗原修复液(1X) 100ml,500ml 抗原修复液 封闭 abs933 Goat serum 10ml,50ml 封闭血清 abs936 Horse serum 200ml(2*100ml) 封闭血清 abs939 Normal Monkey serum 100ml 封闭血清 abs937 Normal mouse serum 100ml 封闭血清 abs946 Rabbit serum 10ml,50ml 封闭血清 abs947 Rat serum 100ml 封闭血清 abs935 The ass/donkey serum 10ml,50ml 封闭血清 abs9155 牛血清白蛋白(BSA) 50g,100g 封闭液 抗体孵育 ★★★★★ abs957 即用型高效免疫组化二抗试剂盒 5ml 二抗试剂盒 ★★★★★ abs929 PAP Pen 组化笔 1支 组化笔 显色/复染 ★★★★★ abs9210 DAB 显色试剂盒(棕黄色,IHC) 1kit 显色试剂 ★★★ abs47047616 DAPI染色液 10ml,50ml 荧光染料 abs9105 Propidium Iodide 5mg,10mg 荧光染料 abs9140 Methyl Green, 0.1% w/v aq. soln. 100ml 荧光染料 abs9142 Nuclear Fast Red 5g 荧光染料 ★★★★ abs9217 苏木素-伊红(HE)染色试剂盒 10g,25g 荧光染料 封片 abs9177 中性树胶(镜检用封片剂) 100ml abs9234 抗荧光淬灭封片液 5ml abs9235 抗荧光淬灭封片液(含DAPI) 5ml,25ml abs9236 抗荧光淬灭封片液(含PI) 1ml
二抗、标签抗体、对照抗体;WB相关:ECL发光液、预染marker、预制胶;IHC相关:二抗试剂盒、组化笔;IP/CoIP试剂盒;细胞因子、信号通路调节剂;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡试剂盒、呼吸爆发试剂盒;动植物提取物,定制服务(抗体/多肽/蛋白)...