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- ECL化学发光检测试剂盒常见问题
- 点击次数:2558 更新时间:2019-10-30
爱必信热卖单品ECL化学发光检测试剂盒,灵敏度更高,背景更低,稳定性更好。常备现货, 小编整理了ECL 的常见问题,助您的实验更顺利!
问题 原因 方法 白色条带黑色背景 体系中HRP过量 进一步稀释HRP 标记 膜上有棕色或黄色条带 背景发亮 信号弱或无信号 HRP过量,消耗底物 进一步稀释HRP 标记 抗原或抗体不足 增加抗体 使用超级ECL 转膜失败 优化转膜条件 HRP 活性低 测试HRP 活性:暗室中,将1ul未稀释的HRP 放入装有1-2ml的基质工作
溶液的试管中。 几分钟内,溶液会立即发出蓝光。高背景 HRP过量,消耗底物 进一步稀释HRP 标记 封闭不充分或使用了不适当的封闭试剂 优化转膜条件 洗涤不充分 增加洗涤时间和次数 膜过度曝光 减少曝光时间 抗原、抗体 过量 减少抗体上样量 抗体特异性差 优化抗体特异性 条带有斑点 转膜失败 优化转膜条件 x射线胶片与膜之间有气泡 去除所有气泡后,再曝光到胶片上 背景有斑点 形成聚合体 使用前通过0.2um过滤器过滤hrp -偶联物 电泳转移过程中温度过高 控制电泳和转移过程中的温度 非特异性条带 HRP-偶联物过量 进一步稀释hrp -偶联物 SDS导致非特异性蛋白结合 在免疫检测过程中不要使用SDS 抗体特异性差 优化抗体特异性
二抗、标签抗体、对照抗体;WB相关:ECL发光液、预染marker、预制胶;IHC相关:二抗试剂盒、组化笔;IP/CoIP试剂盒;细胞因子、信号通路调节剂;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡试剂盒、呼吸爆发试剂盒;动植物提取物,定制服务(抗体/多肽/蛋白)...爱必信(上海)生物科技有限公司
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