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- 预染marker的具体要求
- 点击次数：1717 更新时间：2017-05-17
- 预染marker通常细胞增殖实验每孔加 3000 个细胞，细胞毒性实验每孔加入 6000 个细胞。具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定。37℃ 5%CO2 继续培养或按照实验具体需要进行培养，一般培养 6～24h。按照实验具体要求，给予 0～20ml 干预药物处理，37℃ 5%CO2 继续培养至合适时间。预染marker分子量范围 – 10 种蛋白分子量范围在10 到170kDa 之间。易于使用 – 与上样缓冲液预先混合，可直接凝胶上样，无需煮沸。条带清晰 – 亮度类似，但颜色不同的条带便于观察。质量检测 – 每批次均经过SDS-PAGE 和Western blotting 验证。两个参考条带 – 70kDa 为橙色，10kDa 为绿色。与膜兼容 – Western blotting 时彩色条带将转移到膜上应用，监测SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳期间蛋白的迁移。监测Western blotting 蛋白转移到膜上的情况。测定SDS 聚丙烯酰胺凝胶和Western blots 上的蛋白分子量。预染marker细胞用含血清的培养液培养至对数生长期，常规胰蛋白酶消化液消化细胞(悬浮细胞无需消化)。低速离心，收集细胞沉淀。用培养液重悬细胞沉淀，制备成单细胞悬液，并计数。细胞接种于96孔培养板，一般接种密度为3000～10000个细胞/孔。